PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞)細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞)細胞培養的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細胞
在實(shí)驗過(guò)程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長(cháng)時(shí)間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過(guò)細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類(lèi)型的細胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究?jì)热荼阌谟^(guān)察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
 
小鼠肝實(shí)質(zhì)細胞*培養基100mL

TCBS瓊脂平板/弧菌選擇瓊脂平板/TCBS Agar Plate10塊國產(chǎn)/進(jìn)口

THP-1(人髓系白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2

胰腺英文名稱(chēng)：JF305

小鼠畸胎瘤細胞英文名稱(chēng)：P19

人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞英文名稱(chēng)：U251

藍色預染中分子量蛋白Marker50次國產(chǎn)

WI-38(人胚肺細胞)5×106cells/瓶×2

NRK-52E(大鼠腎小管導管上細胞)5×106cells/瓶×2gersion

HL-60, 人早幼粒白血病細胞

B16/黑色素瘤株國產(chǎn)

中分子量單一蛋白Marker（45 kD）苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

桿菌屬 Lactobacillus sp.mCF, 小鼠心臟成纖維細胞
PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞)0.312-20 ng/mL人層粘連蛋白β1亞基(LAMB1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Laminin subunit beta-1

0.78-50 ng/mL人胎盤(pán)蛋白13(PPL13)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Human Placental protein 13-like

0.156-10 ng/mL人白細胞免疫球蛋白樣受體亞科B成員2(LIRB2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 2

31.2-2000 pg/mL人包含蛋白1的 LETMD1結構域(LETMD1) ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mLELISA Kit for Human LETM1 domain-containing protein 1
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